10x 单细胞转录组测序



产品介绍


10x 单细胞转录组测序是基于 10x Genomics 平台的单细胞高通量测序技术,核心是通过微流控技术实现单个细胞的分离、标记与建库,进而高通量检测单个细胞内mRNA 转录本信息,揭示细胞群体的异质性。



应用领域

 1、肿瘤生物学研究

 2、免疫学研究  3、发育生物学研究  4、神经科学研究  5、干细胞与再生医学研究

 6、感染与炎症性疾病研究  7、植物学研究

技术原理

分析内容














一、标准信息分析 1. 测序数据统计与评估:涵盖各样本基础质控(reads数、测序饱和度等)、数据比对(细胞数目统计、reads基因组比对率等)及基因表达定量分析; 2. 单细胞亚群分类与可视化:完成细胞过滤、亚群分类,并通过TSNE图实现分类结果可视化; 3. 亚群上调表达基因分析:开展上调基因筛选与表达分布检测,同步进行蛋白质互作网络构建,以及GO/KEGG功能富集、人源DO基因疾病富集、人/大鼠/小鼠源Reactome通路富集等分析; 4. 基因集变异分析(GSVA); 二、高级信息分析 1. 拟时分析(Monocle):推断发育过程中细胞分化轨迹或细胞亚型演化路径; 2. 拟时分析(PAGA):计算细胞亚群连通性,经检验后构建PAGA网络图并筛选差异表达基因; 3. 细胞通讯分析(限人、小鼠、大鼠):通过统计不同细胞类型中受体与配体的表达及配对情况,推断细胞间相互作用; 4. 转录因子分析(限人、小鼠、果蝇):分析不同细胞/细胞类型间转录因子调控活性差异,绘制转录调控网络图; 5. 细胞周期分析(限人、小鼠、大鼠):推断单个细胞的细胞周期状态; 6. 单细胞CNV分析(限肿瘤样本):基于基因相对表达量推测单细胞染色体区域CNV,开展肿瘤克隆亚型分析及CNV分布分析; 7. RNA速率分析:通过mRNA生成与降解的动态变化,推断细胞分化发育轨迹。

研究结果

                    分组t-SNE展示

RNA velocity分析
细胞通讯分析
拟时序分析
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